探索神经网络

探索神经网络 微管已知的传统功能包括支持细胞结构和形状,它同时也扮演主导以微管为基础的细胞器和蛋白质运送通道的角色,这在神经细胞里尤为重要。高质量的影像可以用来协助神经科学和细胞骨架找出尚未被解答的3D微管组织问题,微管的动态和稳定性如何被调节,以及上述调节机制如何影响细胞运作。 在这里,我们可以看到从小鼠脑中取得的海马体神经元,在培养基里经由免疫荧光技术处理 12 天后的图像。神经元由 beta III Tubulin(洋红)染色,是微管蛋白的一种微管元素,几乎只能在神经元里可以找到;Camsap2(绿色)是一种微管组织蛋白质,专门连接非中心体微管组织负端以及调节他们的动态和组织。 在图 A,我们可以比较宽敞模式和借由从CrestOptics [...]

从秀丽隐杆线虫的行为学习

从秀丽隐杆线虫的行为学习 其小巧的神经系统仅有302个神经元和8,000个突触连接,秀丽隐杆线虫是目前神经系统唯一被完全分析画出的动物。此外,虽然线虫体积小,但能产生丰富的资料库,包含简单和复杂等行为。因此,它也是解决神经科学极具挑战性的优质管道:揭开神经系统如何从环境中吸收信息,并导致任何行为来回应外界改变。 高分辨率呈像技术能够有效地呈现快速测量体积且持平的神经元呈像,以及能展现广泛神经元的转基因动物、基因编码过的钙指标和微流控芯片 搭配,能够结合所有大脑成像以及复杂感官刺激的图案,包括从化学刺激到温度或氧气改变等范围。 以下我们提供在微流控芯片装置里,转基因线虫展现广泛神经元以及基因编码过的钙荧光指标。荧光信号从GCaMP5K (NLS-GCaMP5K) 核心产生,这在核酸里有但神经纤维网里不存在的。为了瘫痪其肌肉和抑制动作,线虫先前已曝露于左旋咪唑 (levamisole) 下,这是一种特定的乙酰胆碱受体激动剂。设定好这种条件后,我们便能观察期望的实验性条件下的神经元活动(亦即曝露在特定化学刺激中)。尤其是,缩时摄影是利用 X-Light [...]

低倍放大转盘共聚焦:选择相机考虑因素

低倍放大转盘共聚焦:选择相机考虑因素 在共聚焦转盘上拥有2个相机口的其中一个好处是能结合规格大相径庭的2台相机。 最常见的相机种类(大视场和11um像素)可以搭配小像素相机 (4.25um) ,以低倍放大物镜来更好地对接抽样频率和后项分辨率 在此特定测试,我们并行测试Andor Sona和Teledyne Photometrics IRIS15,在X-Light V3共焦距上使用4X、10X和20X物镜(尼康Plan [...]

超高分辨率显微镜,用来观察在有丝分裂退出时的微管和核纤层蛋白形成

超高分辨率显微镜,用来观察在有丝分裂退出时的微管和核纤层蛋白形成 Download the application note 根据最近Giulia Guarguaglini在意大利研究委员会分子生物和病理学学会(IBPM-CNR 罗马)实验室进行的研究显示,微管相关蛋白质TPX2,是有丝分裂中纺锤体的结合与作用的关键调节物,在有丝分裂间过渡期细胞骨架微管 [...]

用转盘式共聚焦显微镜获取海马树突棘的图像

用转盘式共聚焦显微镜 获取海马树突棘的图像 利用X-Light V2转盘式共聚焦系统获取Thy1‐GFP小鼠大脑中海马冠状切面(厚度为60 µm)的图像。此类小鼠呈现Thy1的神经元在成熟神经元的细胞表面显示出带有GFP的Thy1,因此,此类样本适合用于获取高分辨率图像。 这里是293 Z平面的图像栈(总计29.3 µm)。特别的是,可以观察到树突棘(放大图像),即树突分支上以微米为单位的突出物,大多数兴奋性突出都位于树突棘上。棘状突起在形状和数量方面都不固定,反映了突触连接的可塑性,也是学习和记忆能力的一个关键因素。此外,棘状突起分部密度的改变往往与神经发育和神经退行性疾病有关。因此,获取树突棘的图像可以让我们更好地了解大脑在生理和病理条件下所发生的变化。 [...]

大脑类器官

大脑类器官 基于当前为阻止SARS-CoV-2新型冠状病毒传播而实行的限制策略,我们在意大利科技学会(IIT)- CLNS SAPIENZA的合作者与我们分享了其样品:厚度为50 μm的大脑类器官切片。我们用CrestOptics X-Light V3 转盘式共聚焦系统获取了图像。 远程演示资源 [...]

转盘式共聚焦显微镜下的近红外光谱成像

转盘式共聚焦显微镜下的近红外光谱成像 X-light V2和X-light V3照明器的标准端口支持在400-750 nm范围内提供照明,且不需要任何特殊的附件。基于这一配置,可以在同一样品中同时成像DAPI及NIR染料(如Cy7)。在观察由4种或以上染料染色的样品时,该性能至关重要。在这种情况下,宽波段光学窗口能够更好地选中非重叠的染料。 下图是由可以直接应用于组织切片的原位测序试剂盒染色的一份小鼠大脑样品。 DAPI [...]

小鼠肾脏组织的超高分辨率成像

小鼠肾脏组织的超高分辨率成像 这里是一份用Alexa Fluor 488麦胚凝集素(WGA)染色、并用CrestOptics 超高分辨率视频共聚焦系统成像的16 µm小鼠肾脏组织切片。WGA是研究细胞生物学和小鼠肾脏时使用最广泛的凝集素之一,能够标记肾小球和曲小管中的元素。观察某一组织是演示显微镜光学切片特性的一种实用性方式。 VCS [...]

在显微镜下改造纳米纤维

在显微镜下改造纳米纤维 以油和水为材料制备的双连续相乳状液被改造成了纳米结构,在绿色化学领域具有广阔的应用前景。 下图是用X-Light V3 转盘式共聚焦系统(尼康 CFI Plan Apo Lambda 60X油物镜)获取的沾满尼罗红染料,并用Richardson-Lucy算法逆卷积的纳米结构。 [...]

人诱导多能干细胞所产生类脑室结构的皮质类器官

人诱导多能干细胞所产生类脑室结构的皮质类器官 通过特定分化方案,人诱导多能干细胞能夠产生体外的皮质类器官。 下图为皮质类器官内的一个类脑室结构,在体外50天由MAP2(青色)、Pax6(红色)与N-Cadherin(绿色)染色,标记出类脑室与类下脑室的区域。 X-Light V3转盘共聚焦成像(40x物镜) [...]

用转盘共聚焦检测阿尔茨海默病患者视网膜的生物标记

用转盘共聚焦检测阿尔茨海默病患者视网膜的生物标记 Download the application note 阿尔茨海默氏病 (AD) 患者由于缺乏早期诊断标准,药物治疗和临床试验往往不成功。AD是神经退行性疾病,并且是老龄群体痴呆的主因。当前,各方皆已多次尝试,想在检测体出现症状的初期就分辨生物标记,以检测神经的病理变化。 [...]

纤维基质3D支架中的肿瘤细胞

纤维基质3D支架中的肿瘤细胞 通过与Crisel Instruments srl公司合作,发布於2019年Scuola di Microscopia期刊的成像 胰腺腺癌肿瘤细胞 (BxPC-3) 表达GFP細胞質靶标,并在Rigenerand开发的VITVO 3D生物反应器工具上生长(基质体积:面积4 [...]

低倍率下3D类器官的高分辨率成像

低倍率下3D类器官的高分辨率成像 通过与Crisel Instrument ssrl合作,发布於2019年Scuola di Microscopia期刊的成像 在光学多孔板上以基质胶培养,且從结肠癌原代干细胞活检组织產生的类器官,用Phalloidin-568对细胞骨架染色。 比较宽场、转盘共聚焦与超高分辨率成像的差别。   [...]

高分辨率的丝分裂纺锤体

高分辨率的丝分裂纺锤体 通过与Crisel Instruments srl合作,发布於2019年Scuola di Microscopia期刊的成像 分离自急性髓性白血病患者的造血有丝分裂细胞CD34+,并将中心体和有丝分裂纺锤体标记物染色(中心体蛋白為红色而γ微管蛋白為绿色)。 [...]

斑马鱼活体的成像

斑马鱼活体的成像 斑马鱼活体的成像 通过与Crisel Instruments srl合作,发布於2019年Scuola di Microscopia期刊的成像 荧光蛋白表达的转基因斑马鱼(4天大):神经元细胞膜标记lyn-TagRFP以及细胞核中的钙传感器nls-GCaMP6s。最大强度的Z-投影在下方呈现。 [...]